Hvala vam što ste posjetili Nature.com. Verzija pretraživača koju koristite ima ograničenu podršku za CSS. Za najbolje rezultate preporučujemo korištenje novijeg pretraživača (ili onemogućavanje načina kompatibilnosti u Internet Exploreru). U međuvremenu, kako bismo osigurali kontinuiranu podršku, prikazat ćemo stranicu bez stilova i JavaScripta.
Uspostavljanje životinjskih modela modične promjene (MC) je važna osnova za proučavanje MC. Pedeset četiri novozelandska bijela zeca podijeljena su u grupu lažnih operacija, grupu za mišićnu implantaciju (ME grupa) i grupu za implantaciju nucleus pulposus (NPE grupa). U NPE grupi, intervertebralni disk je eksponiran anterolateralnim lumbalnim kirurškim pristupom i igla je upotrijebljena za punkciju tijela L5 kralješka blizu završne ploče. NP je izvađen iz L1/2 intervertebralnog diska špricem i ubrizgan u njega. Bušenje rupe u subhondralnoj kosti. Hirurški zahvati i metode bušenja u grupi sa mišićnom implantacijom i grupi lažnih operacija bili su isti kao i u grupi sa NP implantacijom. U ME grupi, komad mišića je stavljen u rupu, dok u grupi lažne operacije ništa nije stavljeno u rupu. Nakon operacije urađeno je MR skeniranje i molekularno biološko testiranje. Signal u NPE grupi se promijenio, ali nije bilo očigledne promjene signala u grupi lažnih operacija i ME grupi. Histološka opservacija je pokazala da je uočena abnormalna proliferacija tkiva na mjestu implantacije, a ekspresija IL-4, IL-17 i IFN-γ je povećana u NPE grupi. Implantacija NP u subhondralnu kost može formirati životinjski model MC.
Modične promjene (MC) su lezije završnih ploča kralježaka i susjedne koštane srži vidljive na magnetnoj rezonanciji (MRI). Oni su prilično česti kod osoba sa povezanim simptomima1. Mnoga istraživanja su naglasila važnost MC zbog njegove povezanosti s križoboljom (LBP)2,3. de Roos et al.4 i Modic et al.5 su nezavisno prvi opisali tri različita tipa abnormalnosti subhondralnog signala u vertebralnoj koštanoj srži. Modične promjene tipa I su hipointenzivne na T1-ponderiranim (T1W) sekvencama i hiperintenzivne na T2-ponderiranim (T2W) sekvencama. Ova lezija otkriva završne ploče fisura i susjedno vaskularno granulacijsko tkivo u koštanoj srži. Modic tip II promjene pokazuju visok signal i na T1W i na T2W sekvencama. Kod ove vrste lezije može se naći destrukcija endplate, kao i histološka masna nadomjestka susjedne koštane srži. Modic tip III promjene pokazuju nizak signal u T1W i T2W sekvencama. Uočene su sklerotične lezije koje odgovaraju završnim pločama6. MC se smatra patološkom bolešću kralježnice i usko je povezana s mnogim degenerativnim oboljenjima kralježnice7,8,9.
Uzimajući u obzir dostupne podatke, nekoliko studija pružilo je detaljan uvid u etiologiju i patološke mehanizme MC. Albert et al. sugerira da MC može biti uzrokovan diskus hernijom8. Hu et al. pripisuje MC teškoj degeneraciji diska10. Kroc je predložio koncept "unutrašnje rupture diska", koji kaže da ponavljajuća trauma diska može dovesti do mikropuzanja u završnoj pločici. Nakon formiranja rascjepa, destrukcija završne ploče od strane nucleus pulposus (NP) može izazvati autoimuni odgovor, što dalje dovodi do razvoja MC11. Ma et al. dijelili su sličan stav i izvijestili da autoimunost izazvana NP igra ključnu ulogu u patogenezi MC12.
Ćelije imunog sistema, posebno CD4+ T pomoćni limfociti, igraju ključnu ulogu u patogenezi autoimunosti13. Nedavno otkrivena podskupina Th17 proizvodi proinflamatorni citokin IL-17, potiče ekspresiju hemokina i stimuliše T ćelije u oštećenim organima da proizvode IFN-γ14. Th2 ćelije također igraju jedinstvenu ulogu u patogenezi imunoloških odgovora. Ekspresija IL-4 kao reprezentativne Th2 ćelije može dovesti do teških imunopatoloških posljedica15.
Iako su mnoga klinička istraživanja provedena na MC16,17,18,19,20,21,22,23,24, još uvijek postoji nedostatak odgovarajućih eksperimentalnih modela na životinjama koji bi mogli oponašati MC proces koji se često javlja kod ljudi i može biti koristi se za istraživanje etiologije ili novih tretmana kao što je ciljana terapija. Do danas je prijavljeno samo nekoliko životinjskih modela MC koji proučavaju osnovne patološke mehanizme.
Na osnovu autoimune teorije koju su predložili Albert i Ma, ova studija je uspostavila jednostavan i reproducibilan MC model zeca autotransplantacijom NP u blizini izbušene završne ploče pršljena. Drugi ciljevi su posmatranje histoloških karakteristika životinjskih modela i evaluacija specifičnih mehanizama NP u razvoju MC. U tu svrhu koristimo tehnike kao što su molekularna biologija, MRI i histološke studije za proučavanje progresije MC.
Dva zeca su umrla od krvarenja tokom operacije, a četiri zeca su umrla tokom anestezije tokom MRI. Preostalih 48 zečeva je preživjelo i nisu pokazivali nikakve znakove ponašanja ili neurološke znakove nakon operacije.
MRI pokazuje da je intenzitet signala ugrađenog tkiva u različitim rupama različit. Intenzitet signala tijela L5 pršljena u NPE grupi postepeno se mijenjao 12, 16 i 20 sedmica nakon umetanja (T1W sekvenca je pokazala nizak signal, a T2W sekvenca je pokazala mješoviti signal plus nizak signal) (slika 1C), dok su MRI pojave druge dvije grupe ugrađenih dijelova ostale su relativno stabilne u istom periodu (sl. 1A, B).
(A) Reprezentativni sekvencijalni MRI lumbalne kičme kunića u 3 vremenske tačke. Na slikama grupe lažne operacije nisu nađene nikakve abnormalnosti signala. (B) Karakteristike signala tijela pršljena u ME grupi su slične onima u grupi lažnih operacija, i nije uočena značajna promjena signala na mjestu ugradnje tokom vremena. (C) U NPE grupi, niski signal je jasno vidljiv u T1W sekvenci, a mješoviti signal i nizak signal su jasno vidljivi u T2W sekvenci. Od perioda od 12 do 20 sedmica, sporadični visoki signali koji okružuju niske signale u T2W sekvenci se smanjuju.
Očigledna hiperplazija kosti može se vidjeti na mjestu implantacije tijela kralješka u NPE grupi, a hiperplazija kosti se javlja brže od 12 do 20 sedmica (slika 2C) u poređenju sa NPE grupom, nije uočena značajna promjena na modeliranom kralješku tijela; Lažna grupa i ME grupa (slika 2C) 2A,B).
(A) Površina tijela kralješka na implantiranom dijelu je vrlo glatka, rupa dobro zacjeljuje i nema hiperplazije u tijelu pršljena. (B) Oblik implantiranog mjesta u ME grupi je sličan onom u grupi lažnih operacija, i nema očigledne promjene u izgledu implantiranog mjesta tokom vremena. (C) Hiperplazija kostiju se pojavila na mjestu implantacije u NPE grupi. Hiperplazija kosti se brzo povećavala i čak se proširila kroz intervertebralni disk do kontralateralnog tijela kralješka.
Histološka analiza daje detaljnije informacije o formiranju kosti. Slika 3 prikazuje fotografije postoperativnih rezova obojenih H&E. U grupi lažnih operacija, hondrociti su bili dobro raspoređeni i nije otkrivena ćelijska proliferacija (slika 3A). Situacija u ME grupi bila je slična onoj u grupi lažnih operacija (slika 3B). Međutim, u NPE grupi, veliki broj hondrocita i proliferacija ćelija sličnih NP uočen je na mestu implantacije (slika 3C);
(A) Trabekule se mogu vidjeti blizu završne ploče, hondrociti su uredno raspoređeni sa ujednačenom veličinom i oblikom ćelija i bez proliferacije (40 puta). (B) Stanje mjesta implantacije u ME grupi je slično onom u lažnoj grupi. Trabekule i hondrociti se mogu vidjeti, ali nema očigledne proliferacije na mjestu implantacije (40 puta). (B) Može se vidjeti da se hondrociti i ćelije slične NP značajno razmnožavaju, a oblik i veličina hondrocita su neujednačeni (40 puta).
Ekspresija mRNK interleukina 4 (IL-4), mRNA interleukina 17 (IL-17) i mRNK interferona γ (IFN-γ) uočena je u NPE i ME grupama. Kada su upoređeni nivoi ekspresije ciljnih gena, ekspresija gena IL-4, IL-17 i IFN-γ je značajno povećana u NPE grupi u poređenju sa onima u ME grupi i grupi lažnih operacija (Slika 4). (P < 0,05). U poređenju sa grupom lažne operacije, nivoi ekspresije IL-4, IL-17 i IFN-γ u ME grupi su samo neznatno porasli i nisu dostigli statističku promenu (P > 0,05).
Ekspresija mRNA IL-4, IL-17 i IFN-γ u NPE grupi pokazala je značajno veći trend od onih u grupi lažne operacije i ME grupi (P < 0,05).
Nasuprot tome, nivoi ekspresije u ME grupi nisu pokazali značajnu razliku (P>0,05).
Western blot analiza je izvedena korištenjem komercijalno dostupnih antitijela protiv IL-4 i IL-17 da bi se potvrdio izmijenjen obrazac ekspresije mRNA. Kao što je prikazano na slikama 5A,B, u poređenju sa ME grupom i grupom lažne operacije, nivoi proteina IL-4 i IL-17 u NPE grupi su značajno povećani (P < 0,05). U poređenju sa grupom lažne operacije, nivoi proteina IL-4 i IL-17 u ME grupi takođe nisu postigli statistički značajne promene (P>0,05).
(A) Nivoi proteina IL-4 i IL-17 u NPE grupi bili su značajno viši od onih u ME grupi i placebo grupi (P < 0,05). (B) Western blot histogram.
Zbog ograničenog broja ljudskih uzoraka dobijenih tokom operacije, jasne i detaljne studije o patogenezi MC su donekle teške. Pokušali smo uspostaviti životinjski model MC kako bismo proučavali njegove potencijalne patološke mehanizme. Istovremeno, radiološka evaluacija, histološka evaluacija i molekularno biološka evaluacija korišteni su za praćenje tijeka MC izazvanog NP autograftom. Kao rezultat toga, model implantacije NP rezultirao je postupnom promjenom intenziteta signala od 12 do 20 sedmica vremenskih tačaka (mješoviti nizak signal u T1W sekvencama i nizak signal u T2W sekvencama), što ukazuje na promjene tkiva, te histološke i molekularne biološke evaluacije potvrdile su rezultate radiološke studije.
Rezultati ovog eksperimenta pokazuju da je u NPE grupi došlo do vizuelnih i histoloških promena na mestu povrede tela pršljenova. Istovremeno, uočena je i ekspresija gena IL-4, IL-17 i IFN-γ, kao i IL-4, IL-17 i IFN-γ, što ukazuje da je došlo do povrede autolognog nucleus pulposus tkiva u kralježnici. tijelo može izazvati niz signalnih i morfoloških promjena. Lako je otkriti da su karakteristike signala tijela kralježaka životinjskog modela (nizak signal u T1W sekvenci, mješoviti signal i nizak signal u T2W sekvenci) vrlo slične onima ljudskih kralježnih ćelija, a karakteristike MRI također potvrđuju zapažanja histologije i grube anatomije, odnosno promjene u ćelijama tijela pršljenova su progresivne. Iako se upalni odgovor uzrokovan akutnom traumom može pojaviti ubrzo nakon punkcije, rezultati MRI su pokazali da su se progresivno rastuće promjene signala pojavile 12 sedmica nakon punkcije i potrajale do 20 sedmica bez ikakvih znakova oporavka ili poništavanja MRI promjena. Ovi rezultati sugeriraju da je autologni vertebralni NP pouzdana metoda za utvrđivanje progresivne MV kod kunića.
Ovaj model punkcije zahtijeva adekvatnu vještinu, vrijeme i hirurški napor. U preliminarnim eksperimentima, disekcija ili pretjerana stimulacija paravertebralnih ligamentnih struktura može dovesti do stvaranja vertebralnih osteofita. Treba paziti da ne oštetite ili iritirate susjedne diskove. Budući da se dubina penetracije mora kontrolisati kako bi se dobili konzistentni i ponovljivi rezultati, ručno smo napravili čep odsijecanjem omotača igle dužine 3 mm. Upotreba ovog čepa osigurava ujednačenu dubinu bušenja u tijelu pršljena. U preliminarnim eksperimentima, tri ortopedska kirurga uključena u operaciju otkrila su da je lakše raditi s iglama 16 kalibra nego s iglama 18 ili drugim metodama. Kako bi se izbjeglo prekomjerno krvarenje tokom bušenja, držanje igle na mjestu neko vrijeme će omogućiti prikladniji otvor za umetanje, što sugerira da se određeni stepen MC može kontrolisati na ovaj način.
Iako su mnoge studije usmjerene na MC, malo se zna o etiologiji i patogenezi MC25,26,27. Na osnovu naših prethodnih studija, otkrili smo da autoimunost igra ključnu ulogu u nastanku i razvoju MC12. Ova studija je ispitivala kvantitativnu ekspresiju IL-4, IL-17 i IFN-γ, koji su glavni putevi diferencijacije CD4+ ćelija nakon stimulacije antigenom. U našoj studiji, u poređenju sa negativnom grupom, NPE grupa je imala veću ekspresiju IL-4, IL-17 i IFN-γ, a nivoi proteina IL-4 i IL-17 su takođe bili viši.
Klinički, ekspresija IL-17 mRNA je povećana u NP ćelijama pacijenata sa hernijom diska28. Povećani nivoi ekspresije IL-4 i IFN-γ su takođe pronađeni u modelu akutne nekompresivne diskus hernije u poređenju sa zdravim kontrolama29. IL-17 igra ključnu ulogu u upali, ozljedama tkiva kod autoimunih bolesti30 i pojačava imuni odgovor na IFN-γ31. Prijavljena je pojačana ozljeda tkiva posredovana IL-17 kod MRL/lpr miševa32 i miševa osjetljivih na autoimunost33. IL-4 može inhibirati ekspresiju proinflamatornih citokina (kao što su IL-1β i TNFα) i aktivaciju makrofaga34. Prijavljeno je da je ekspresija mRNA IL-4 različita u NPE grupi u poređenju sa IL-17 i IFN-γ u istom vremenskom trenutku; Ekspresija mRNA IFN-γ u NPE grupi bila je značajno veća nego u ostalim grupama. Stoga, proizvodnja IFN-γ može biti medijator upalnog odgovora izazvanog interkalacijom NP. Studije su pokazale da IFN-γ proizvode više tipova ćelija, uključujući aktivirane T ćelije pomoćnice tipa 1, prirodne ćelije ubice i makrofage35,36, i da je ključni proinflamatorni citokin koji potiče imunološki odgovor37.
Ova studija sugerira da autoimuni odgovor može biti uključen u pojavu i razvoj MC. Luoma et al. otkrili su da su karakteristike signala MC i istaknutog NP slične na MRI, i oba pokazuju visok signal u T2W sekvenci38. Potvrđeno je da su neki citokini blisko povezani sa pojavom MC, kao što je IL-139. Ma et al. sugerira da izbočenje NP prema gore ili prema dolje može imati veliki utjecaj na pojavu i razvoj MC12. Bobechko40 i Herzbein et al.41 su objavili da je NP imunotolerantno tkivo koje ne može ući u vaskularnu cirkulaciju od rođenja. NP izbočine uvode strana tijela u dotok krvi, čime posreduju lokalne autoimune reakcije42. Autoimune reakcije mogu izazvati veliki broj imunoloških faktora, a kada su ti faktori kontinuirano izloženi tkivima, mogu uzrokovati promjene u signalizaciji43. U ovoj studiji, prekomjerna ekspresija IL-4, IL-17 i IFN-γ su tipični imuni faktori, što dodatno dokazuje blisku vezu između NP i MCs44. Ovaj životinjski model dobro oponaša proboj NP i ulazak u završnu ploču. Ovaj proces je dalje otkrio uticaj autoimunosti na MC.
Kao što se i očekivalo, ovaj životinjski model nam pruža moguću platformu za proučavanje MC. Međutim, ovaj model još uvijek ima neka ograničenja: prvo, tijekom faze promatranja životinja, neki zečevi srednje faze moraju biti eutanazirani radi histološkog i molekularnog biološkog testiranja, tako da neke životinje s vremenom „ispadaju iz upotrebe“. Drugo, iako su u ovoj studiji postavljene tri vremenske tačke, nažalost, modelirali smo samo jedan tip MC (modic tip I promjena), tako da nije dovoljno predstavljati proces razvoja bolesti kod ljudi, već je potrebno postaviti više vremenskih tačaka za bolje posmatrajte sve promjene signala. Treće, promjene u strukturi tkiva se zaista mogu jasno pokazati histološkim bojenjem, ali neke specijalizirane tehnike mogu bolje otkriti mikrostrukturne promjene u ovom modelu. Na primjer, polarizirana svjetlosna mikroskopija je korištena za analizu formiranja fibrohrskavice u intervertebralnim diskovima kunića45. Dugoročni efekti NP na MC i završnu ploču zahtijevaju dalje proučavanje.
Pedeset četiri muška novozelandska bijela kunića (težine oko 2,5-3 kg, starosti 3-3,5 mjeseca) nasumično su podijeljena u grupu lažne operacije, grupu za mišićnu implantaciju (ME grupa) i grupu za implantaciju nervnog korijena (NPE grupa). Sve eksperimentalne procedure je odobrio Etički komitet bolnice Tianjin, a eksperimentalne metode su provedene u strogom skladu s odobrenim smjernicama.
Neka poboljšanja su napravljena u hirurškoj tehnici S. Sobajima 46 . Svaki zec je postavljen u bočni ležeći položaj, a prednja površina pet uzastopnih lumbalnih intervertebralnih diskova (IVD) je izložena posterolateralnim retroperitonealnim pristupom. Svaki kunić je dobio opštu anesteziju (20% uretana, 5 ml/kg preko ušne vene). Uzdužni rez kože napravljen je od donjeg ruba rebara do oboda karlice, 2 cm ventralno do paravertebralnih mišića. Desna anterolateralna kičma od L1 do L6 otkrivena je oštrom i tupom disekcijom potkožnog tkiva iznad njega, retroperitonealnog tkiva i mišića (slika 6A). Nivo diska je određen korišćenjem oboda karlice kao anatomskog orijentira za nivo diska L5-L6. Upotrijebite iglu za punkciju 16 kalibra da izbušite rupu blizu završne ploče L5 pršljena do dubine od 3 mm (slika 6B). Koristite špric od 5 ml za aspiraciju autolognog nukleus pulposusa u L1-L2 intervertebralnom disku (slika 6C). Uklonite nucleus pulposus ili mišić prema zahtjevima svake grupe. Nakon što se izbušena rupa produbi, na duboku fasciju, površinsku fasciju i kožu postavljaju se resorptivni šavovi, vodeći računa da se periostalno tkivo tijela pršljena ne ošteti tokom operacije.
(A) L5-L6 disk je izložen posterolateralnim retroperitonealnim pristupom. (B) Upotrijebite iglu kalibra 16 da izbušite rupu blizu završne ploče L5. (C) Autologni MF se sakupljaju.
Opća anestezija je primijenjena sa 20% uretana (5 ml/kg) primijenjenog preko ušne vene, a radiografije lumbalne kičme su ponovljene 12, 16 i 20 sedmica nakon operacije.
Zečevi su žrtvovani intramuskularnom injekcijom ketamina (25,0 mg/kg) i intravenoznog natrijum pentobarbitala (1,2 g/kg) 12, 16 i 20 nedelja nakon operacije. Cijela kičma je uklonjena radi histoloske analize i urađena je prava analiza. Kvantitativna reverzna transkripcija (RT-qPCR) i Western blotting korišteni su za otkrivanje promjena u imunološkim faktorima.
MRI pregledi su obavljeni na zečevima pomoću kliničkog magneta od 3,0 T (GE Medical Systems, Florence, SC) opremljenog prijemnikom ortogonalnog namotaja udova. Kunići su anestezirani sa 20% uretana (5 mL/kg) preko ušne vene, a zatim stavljeni na leđa unutar magneta sa lumbalnom regijom usredsređenom na kružnu površinsku spiralu prečnika 5 inča (GE Medical Systems). Koronalne T2-ponderisane lokalizatorske slike (TR, 1445 ms; TE, 37 ms) su snimljene da bi se definisala lokacija lumbalnog diska od L3–L4 do L5–L6. T2-ponderisani rezovi sagitalne ravni su dobijeni sa sledećim postavkama: brza spin-eho sekvenca sa vremenom ponavljanja (TR) od 2200 ms i eho vremenom (TE) od 70 ms, matrica; vidno polje od 260 i osam stimulusa; Debljina rezanja je bila 2 mm, razmak je bio 0,2 mm.
Nakon što je napravljena posljednja fotografija i posljednji zec je ubijen, lažni, mišićni i NP diskovi su uklonjeni za histološki pregled. Tkiva su fiksirana u 10% neutralnom puferiranom formalinu 1 sedmicu, dekalcifikovana etilendiamintetrasirćetnom kiselinom i parafinska sekcija. Blokovi tkiva su ugrađeni u parafin i izrezani na sagitalne dijelove (debljine 5 μm) pomoću mikrotoma. Rezovi su obojeni hematoksilinom i eozinom (H&E).
Nakon prikupljanja intervertebralnih diskova od zečeva u svakoj grupi, ukupna RNK je ekstrahirana pomoću UNIQ-10 kolone (Shanghai Sangon Biotechnology Co., Ltd., Kina) prema uputama proizvođača i ImProm II sistema reverzne transkripcije (Promega Inc. , Madison, WI, SAD). Izvršena je reverzna transkripcija.
RT-qPCR je izveden korišćenjem Prism 7300 (Applied Biosystems Inc., SAD) i SYBR Green Jump Start Taq ReadyMix (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, SAD) prema uputstvima proizvođača. Volumen PCR reakcije bio je 20 μl i sadržavao je 1,5 μl razrijeđene cDNK i 0,2 μM svakog prajmera. Prajmere je dizajnirao OligoPerfect Designer (Invitrogen, Valencia, CA), a proizveo Nanjing Golden Stewart Biotechnology Co., Ltd. (Kina) (Tablica 1). Korišteni su sljedeći uvjeti termičkog ciklusa: početni korak aktivacije polimeraze na 94°C u trajanju od 2 min, zatim 40 ciklusa od po 15 s na 94°C za denaturaciju šablona, žarenje 1 min na 60°C, ekstenzija i fluorescencija. mjerenja su vršena 1 min na 72°C. Svi uzorci su amplificirani tri puta, a prosječna vrijednost je korištena za RT-qPCR analizu. Podaci o amplifikaciji su analizirani pomoću FlexStation 3 (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA). Ekspresija gena IL-4, IL-17 i IFN-γ normalizovana je na endogenu kontrolu (ACTB). Relativni nivoi ekspresije ciljne mRNA su izračunati korišćenjem 2-ΔΔCT metode.
Ukupni protein je ekstrahovan iz tkiva pomoću homogenizatora tkiva u RIPA puferu za lizu (koji sadrži koktel inhibitora proteaze i fosfataze), a zatim centrifugiran na 13.000 rpm tokom 20 minuta na 4°C da bi se uklonili ostaci tkiva. Pedeset mikrograma proteina je napunjeno po traci, odvojeno sa 10% SDS-PAGE, a zatim prebačeno na PVDF membranu. Blokiranje je izvedeno u 5% nemasnom suvom mleku u Tris-puferisanom fiziološkom rastvoru (TBS) koji sadrži 0,1% Tween 20 tokom 1 h na sobnoj temperaturi. Membrana je inkubirana sa primarnim anti-dekorin zečjim antitelom (razblaženo 1:200; Boster, Wuhan, Kina) (razblaženo 1:200; Bioss, Peking, Kina) preko noći na 4°C i reagovala je drugih dana; sa sekundarnim antitijelom (kozji anti-zečji imunoglobulin G u razrjeđenju 1:40,000) u kombinaciji sa peroksidazom hrena (Boster, Wuhan, Kina) 1 sat na sobnoj temperaturi. Western blot signali su detektovani povećanom hemiluminiscencijom na hemiluminiscentnoj membrani nakon zračenja rendgenskim zrakama. Za denzitometrijsku analizu, mrlje su skenirane i kvantificirane pomoću softvera BandScan, a rezultati su izraženi kao omjer imunoreaktivnosti ciljnog gena i imunoreaktivnosti tubulina.
Statistički proračuni su obavljeni pomoću softverskog paketa SPSS16.0 (SPSS, SAD). Podaci prikupljeni tokom studije izraženi su kao srednja vrijednost ± standardna devijacija (srednja vrijednost ± SD) i analizirani korištenjem jednosmjerne analize varijanse ponovljenih mjera (ANOVA) kako bi se utvrdile razlike između dvije grupe. P < 0,05 se smatra statistički značajnim.
Stoga, uspostavljanje životinjskog modela MC implantacijom autolognih NP u tijelo kralježaka i izvođenjem makroanatomskog promatranja, MRI analize, histološke procjene i molekularne biološke analize može postati važan alat za procjenu i razumijevanje mehanizama ljudskog MC i razvoj novih terapijskih intervencije.
Kako citirati ovaj članak: Han, C. et al. Životinjski model Modic promjena je uspostavljen implantacijom autolognog nucleus pulposusa u subhondralnu kost lumbalne kralježnice. Sci. Rep. 6, 35102: 10.1038/srep35102 (2016).
Weishaupt, D., Zanetti, M., Hodler, J., i Boos, N. Magnetna rezonanca lumbalne kičme: prevalencija hernije i retencije diska, kompresija korijena živaca, abnormalnosti završne ploče i osteoartritis fasetnih zglobova u asimptomatskih dobrovoljaca . stopa. Radiology 209, 661–666, doi:10.1148/radiology.209.3.9844656 (1998).
Kjaer, P., Korsholm, L., Bendix, T., Sorensen, JS, i Leboeuf-Eed, K. Modic promjene i njihov odnos prema kliničkim nalazima. European Spine Journal: zvanična publikacija Evropskog društva za kičmu, Evropskog društva za deformitet kičme i Evropskog društva za istraživanje vratne kičme 15, 1312–1319, doi: 10.1007/s00586-006-0185-x (2006).
Kuisma, M., et al. Modične promjene na završnim pločama lumbalnog kralješka: prevalencija i povezanost s bolovima u donjem dijelu leđa i išijasom kod radnika srednjih godina. Spine 32, 1116–1122, doi:10.1097/01.brs.0000261561.12944.ff (2007).
de Roos, A., Kressel, H., Spritzer, K., i Dalinka, M. MRI promjena koštane srži u blizini završne ploče kod degenerativne bolesti lumbalne kičme. AJR. American Journal of Radiology 149, 531–534, doi: 10.2214/ajr.149.3.531 (1987).
Modic, MT, Steinberg, PM, Ross, JS, Masaryk, TJ i Carter, JR Degenerativna bolest diska: procjena promjena u srži kralježnice pomoću MRI. Radiology 166, 193–199, doi:10.1148/radiology.166.1.3336678 (1988).
Modic, MT, Masaryk, TJ, Ross, JS, i Carter, JR Snimanje degenerativne bolesti diska. Radiology 168, 177–186, doi: 10.1148/radiology.168.1.3289089 (1988).
Jensen, TS, et al. Prediktori neovertebralne endplate (Modic) signaliziraju promjene u općoj populaciji. European Spine Journal: Službena publikacija Evropskog društva za kičmu, Evropskog društva za deformitet kičme i Evropskog društva za istraživanje vratne kičme, Divizija 19, 129–135, doi: 10.1007/s00586-009-1184-5 (2).
Albert, HB i Mannisch, K. Modic promjene nakon lumbalne diskus hernije. European Spine Journal : Službena publikacija Evropskog društva za kičmu, Evropskog društva za kičmeni deformitet i Evropskog društva za istraživanje vratne kičme 16, 977–982, doi: 10.1007/s00586-007-0336-8 (2007).
Kerttula, L., Luoma, K., Vehmas, T., Gronblad, M., i Kaapa, E. Modic tip I promjene mogu predvidjeti brzo progresivnu deformacijsku degeneraciju diska: jednogodišnja prospektivna studija. European Spine Journal 21, 1135–1142, doi: 10.1007/s00586-012-2147-9 (2012).
Hu, ZJ, Zhao, FD, Fang, XQ i Fan, SW Modic promjene: mogući uzroci i doprinos degeneraciji lumbalnog diska. Medicinske hipoteze 73, 930–932, doi: 10.1016/j.mehy.2009.06.038 (2009).
Krok, HV Interna ruptura diska. Problemi s prolapsom diska preko 50 godina. Kičma (Phila Pa 1976) 11, 650–653 (1986).
Vrijeme objave: 13.12.2024